脂肪氧化酶活性测定

一、蛋白质 盐析分离的原理：

      蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶)，当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子 表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，后经离心机 分离后获得沉淀物和上清液。

二、影响蛋白 质盐析分离的因素：

      1、蛋白质浓度 ：

      蛋白质浓度过大，盐析时发生共沉现象，分离效果不好。蛋白质浓度太稀，耗盐量过大，蛋白质回收率低。一般蛋白质浓度在2.5%～3.0%较适中。

      2、离子强度：

      离子强度越大，蛋白质的溶解度越低，越容易产生盐析现象。

      3、离子类型：

      离子半径小而价数高的离子，对盐析影响较强。离子半径大而价数低的离子，对盐析影响较弱。

      4、PH值：

      蛋白质所带净电荷越多，溶解度越大。净电荷为零时，溶解度低。一般将PH值调到蛋白质等电点附近，这样有利于盐析。

      5、温度：

      低离子强度或水中，在一定范围内蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大。高盐溶液中，蛋白质的溶解度随着温度的升高有时反而下降。一般情况下在0～4℃操作