如何进行培养基灭菌

  在发酵过程中，培养基灭菌主要有以下几个原因：如不灭菌，会使生物反应
的基质或产物，因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降;杂菌也会产生代谢
产物，这就使产物的提取更加困难，造成得率降低，产品质量下降;杂菌大量繁
殖后，会改变反应液的 pH 值，使反应异常;有些杂菌会分解产物，使生产失败;
如果发生噬菌体污染，生产菌细胞将被裂解，使生产失败。怎样进行培养基灭菌?
 湿热灭菌
 培养基灭菌大多数用湿热灭菌。衡量热灭菌的指标很多，zui常用的是“热死
时间”，即在限定的温度下杀死原有微生物中一定比例所需的持续时间。影响热
灭菌的温度和时间的因素很多，包括：微生物种类、性质、浓度和培养基的性质、
浓度等。
 (1)连续灭菌
 连续灭菌也叫连消，其温度一般以 126～132 ℃为宜，总蒸汽压力要求达到
0.044～0.049 MPa 以上。培养基采用连续灭菌时，需在培养基进入发酵罐前，
直接用蒸汽进行空罐灭菌(空消)，用无菌空气保压，待培养基流入罐后，开始冷
却。灭菌时对培养基的加热可采用各种加热器。培养基的冷却方式有喷淋冷却式、
真空冷却式、薄板换热器式几种方式，其过程均包括加热、维持和冷却。
 (2)间歇灭菌
 间歇灭菌即实消，是在每批培养基全部流入发酵罐后，就在罐内通入蒸汽加
热至灭菌温度，维持一定时间，再冷却到接种温度。实罐灭菌时，发酵罐与培养
基一起灭菌。
 其他灭菌设备一般采用蒸汽灭菌，如设备十分耐压，则可采用较高的温度，
但必须注意设备内部的凹处及露出的小配管等蒸汽不能到达的部位。
 高压蒸汽灭菌
 高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在制
备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在 24h 内完成灭菌工作。灭
菌时一般是在 0.105MPa 压力下，温度 121℃时，灭菌 15~30min 即可。消毒时间
不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质特别是维生素类物质就会
在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固